1.灭菌器的损坏，如真空泵效果下降，灭菌器使用时间长，灭菌器老化，致使柜内未达到应有的真空程度。

2.自控系统失灵，抽气时间缩短，不利于冷空气的释放与排除，图案边缘黑，中间白，呈现明显的冷气团。

3.柜室密封性能下降，不能维持规定的负压，造成排出冷空气的同时仍有冷空气的渗入。

4.空气起始温度低，重力作用明显。

5.送入蒸汽动能偏高，造成进气速度及时间过快，即出现超高热现象，将过多的空气挤入试验包内，图案呈银灰色透亮或灰白；蒸汽压力过低进气过慢，影响热力穿透，图案深浅不均匀；蒸汽过湿，蒸汽不饱和，含水量多，蒸汽与水混合，降低其潜热影响其穿透力，导致试验失败，图案中间发黄。

6.试验包布巾未经洗涤，新棉布巾未洗净，有浆存在，蒸汽难透过；旧棉布巾测试后未洗涤，布与布之间受高热蒸汽的影响，互相压紧，也会使蒸汽不易穿透，影响潜热的释放，试纸图案中间色泽浅。

7.试验包与柜室容量相比过小，产生“小装量”效应。

以上七条原因中有四条原因与灭菌柜性能有关，一条原因与蒸汽质量有关，两条原因与操作有关。