湿热灭菌法是指利用饱和水蒸气或过热水进行灭菌的方法，湿热灭菌法是一种热力灭菌方式。例如纯蒸汽灭菌和过热水灭菌均属于湿热灭菌法。湿热灭菌法方式灭菌能力强，为热力灭菌中最有效、应用最广泛的方法。
在同样的温度下，湿热的灭菌效果比干热好，其原因有:
①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，含水量愈大，发生凝固所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分，较同一温度的干热空气中易于凝固。
②湿热灭菌过程中蒸气放出大量潜热，加速提高湿度，因而湿热灭菌比干热灭菌所需温度低，如在同一温度下，则湿热灭菌所需时间比干热灭菌短。
③湿热的穿透力比干热大，使物品深部也能达到灭菌温度，故湿热灭菌比干热灭菌的效果好。
常见的湿热灭菌器种类
1、 脉动真空式蒸汽灭菌器也称湿热灭菌柜或预真空灭菌器，在药品生产中应用最为广泛的高压蒸汽灭菌器，通常由灭菌腔体、密封门、控制系统、管路系统等组成，并连接压缩空气、蒸汽/纯蒸汽、真空泵等。
2、 蒸汽-空气混合灭菌器 ，配有灭菌腔体、离心风机、换热器、隔板，并连接压缩空气、蒸汽/纯蒸汽、真空泵等。
3、高压过热水喷淋灭菌器也称水浴灭菌柜，它主要是利用过热循环水作为灭菌加热载体，对物品进行过热水喷淋的灭菌操作。